ELISA試劑盒檢測中用到的樣品處理方法
瀏覽次數：7615發(fā)布日期：2013-08-21
hbzhan內容導讀：試劑盒使用時一定要根據自己的實驗需要購買提取試劑盒，如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質量以及完整性，會影響RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等后續(xù)實驗的結果。
1.細胞培養(yǎng)物上清：
細胞培養(yǎng)物于室溫1000g，離心10分鐘后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融。
2.血清：
標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后與1000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
3.血漿：
可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內于2-8℃，1000g離心15分鐘，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
4.尿液：
無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，既可用于檢測，要長期保存尿樣，可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱長期保存。
5.組織勻漿：
將組織標本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經過二次反復凍融破膜，5000g,4℃離心5分鐘，取上清即可檢測。
當前提取效果好的是QIANGEN公司生產的RNA提取
試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用話費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當然還有其它的進口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內無貨的時候，要從國外發(fā)貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內生產的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，性價比還可以。
當然，就RNA的提取而言，不一定
試劑盒的提取效果就非常好，其實采用一些經典的RNA提取方法，效果也很不錯，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經典的方法操作復雜一些。
